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液氮冷冻和恒温水浴融化技术相结合破碎细胞

[导读]细胞破碎技术。

在液氮冷冻技术破碎细胞试验中,大多是采用反复冻融一溶酶体一超声破菌相结合来破大肠杆菌细胞壁,在此方法中存在易使部分蛋白变性、耗费时间长等弊端。在臧明丽液氮法破碎细菌细胞中利用液氮冷冻和恒温水浴融化技术相结合破碎细胞,采用液氮冷冻技术和30℃水浴取代反复冻融,并在融化过程中不断摇晃,避免管壁温度太高而使表面蛋白变性,继而提取胞内生物分子。此方法缩短了破碎细胞的时间,并且提高了细胞的破碎率。同时,在离心去除可溶性蛋白后用低浓度的变性剂洗涤包涵体,此步可去除大量杂质,提高了蛋白的纯化效率,且为后续蛋白的纯化减轻了很大的工作量。

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