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新芝-细胞粉碎蛋白提取

[导读]新芝仪器-银耳总蛋白的有效提取是进行银耳蛋白质生理功能研究的重要前提,不同食用菌材料的最适提取方法不同,在对虎奶菇菌丝体自溶蛋白质制备方法的研究中,比较了超声波和液氮研磨两种细胞破碎方法,发现液氮研磨得到的粗蛋白和纯蛋白产量均高于超声波法。

期以来对于银耳生理功能的研究主要集中在银耳多糖及酚酸等方面,而蛋白质作为银耳中第二大类营养成分,对其生理功能的研究较少。银耳总蛋白的有效提取是进行银耳蛋白质生理功能研究的重要前提,不同食用菌材料的最适提取方法不同,在对虎奶菇菌丝体自溶蛋白质制备方法的研究中,比较了超声波和液氮研磨两种细胞破碎方法,发现液氮研磨得到的粗蛋白和纯蛋白产量均高于超声波法;在草菇菌丝及子实体总蛋白的提取中采用了三氯乙酸(trichloroaceticacid,TCA)-丙酮沉淀法;在灵芝子实体原基总蛋白质的提取中,比较了三羟甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)methyl aminomethane,Tris)-饱和酚法和TCA-丙酮沉淀法的提取效果,而有关银耳总蛋白的提取目前却鲜有报道。

  银耳芽孢是银耳担孢子产生的酵母状分生孢子,俗称“芽孢”(yeast-like conidia,YLC),比菌丝体及子实体更易获得。本研究以银耳芽孢为材料,在液氮研磨的基础上分别采用超声波与高压均质进行细胞破碎,比较Tris-饱和酚法、TCA-丙酮沉淀法及Tris-饱和酚结合TCA-丙酮沉淀法3 种方法提取银耳芽孢总蛋白的效果,旨在建立一种有效的银耳芽孢总蛋白提取方法,为后续银耳蛋白质生理功能的探索、蛋白质组学的研究及在食品加工中的应用奠定基础。


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