超声波提取玉竹总皂苷的工艺研究

玉竹(Polygonatumodoratum)为百合科黄精属植物,以其干燥根茎入药。玉竹的化学成分主要包括皂苷、多糖、生物碱、黄酮等,具有增强免疫力、降压、抗衰老、抗肿瘤等功效。其中皂苷类化合物具有较强的抗氧化能力,抗衰老,增强机体免疫力的生物活性。甾体皂苷类化合物被认为是玉竹的主要有效成分之一,按其苷元类型可分为螺甾烷醇类和呋甾烷醇类两类结构类型。 目前,文献显示,玉竹总皂苷类型主要以呋甾烷醇类即薯蓣皂苷元类型皂苷为主。因此,用紫外检测常采用甲醇-硫酸法或高氯酸法在408nm波长处具有最大吸收值。本课题玉竹来源于北京同仁堂(亳州),发现其提取出的总皂苷在采用高氯酸显色法时的紫外最大吸收波长(315nm)与菝葜皂苷元类型皂苷采用该法的最大吸收波长(310nm)基本吻合。因为薯蓣皂苷元与菝葜皂苷元结构上相差一个双键,采用高氯酸法的紫外吸收波长位置不同,所以可推测出,不同产地的玉竹中所含总皂苷类型不同。因此,用薯蓣皂苷元作为玉竹总皂苷的对照品具有一定局限性。本课题所采用菝葜皂苷元作为对照品,增加了一种新的测量玉竹总皂苷的方法。 响应面法是一种统计学实验设计方法,目前常被用于植物提取过程的优化,确定最佳水平范围。本实验在单因素实验中分别考察了超声波功率、超声时间、料液比对得率的影响。在单因素实验结果基础上与玉竹总皂苷提取含量进行响应面实验设计,优化总皂苷提取条件。通过Design-Expert软件对实验数据进行回归分析,预测玉竹总皂苷提取的最优产率。为进一步开发利用玉竹资源以及新药研发提供科学稳定的依据。

 1材料与方法 1.1材料与仪器 玉竹市售中药饮片,经吉林化工学院王晓林教授鉴定为百合科黄精属植物玉竹的地下根茎(北京同仁堂(亳州)饮片有限责任公司);菝葜皂苷元对照品为色谱纯(供含量测定用,批号:PCM-AA-001)天津士兰科技有限公司;乙醇、甲醇、高氯酸、石油醚均为分析纯天津市永大化学试剂有限公司。 某型电脑微波超声波紫外光组合催化合成仪;某型紫外-可见分光光度计;某型电子分析天平;某型高温鼓风干燥箱;某型旋转蒸发仪。 

1.2实验方法 1.2.1药材的预处理 取50干燥24h的玉竹饮片,粉碎,过20目筛。准确称取50.0g,置于圆底烧瓶中,加入一定量石油醚(60~90)加热回流脱脂。抽滤,除去滤液,烘干,得到预处理的玉竹。

 1.2.2供试品溶液的配制 精确称取预处理的玉竹2.0g于50mL三口瓶中,加入一定量60%乙醇,在一定的超声功率下,加热至50超声提取后,减压过滤,滤液旋转蒸发至干,将提取物溶于适量蒸馏水,加入5倍体积无水乙醇沉淀脱糖(过夜沉淀)。过滤,滤液旋转蒸发至干,加入适量蒸馏水使其溶解,转移到分液漏斗中,加入正丁醇萃取两次(每次20mL),合并正丁醇相,将萃取液旋蒸浓缩至干,干膏用甲醇溶解,并用0.45m滤膜过滤,滤液转移到10mL容量瓶中,加甲醇至刻度,得到供试品溶液。 

1.2.3对照品溶液的配制 精密称取菝葜皂苷元对照品6.0mg,置于25mL容量瓶中,加入无水甲醇,超声使之溶解,并用无水甲醇定容至刻度,配制成菝葜皂苷元对照品溶液(0.24mg/mL)。