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新芝超声-研究铁皮石斛的抗氧化性

2021-04-02 类型:新闻资讯
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铁皮石斛是兰科石斛属多年生附生草本植物的全草,自古以来石斛就有“药中黄金”的美誉,道家医 学经典《道藏》更将铁皮石斛列为“九大仙草”之首, 民间称其为“救命仙草”。铁皮石斛含有多糖、生 物碱等生物活性成分数百种之多 , 主要有效成分石斛 多糖具有较强的抗氧化活性 。大量研究表明,铁皮 石斛具有抗肿瘤 、免疫调节  、降血糖 、抗衰老等功效,然而,鲜有关于石斛对人体综合影响 的研究。人体表穴位间电位实时监测的方法能对抗氧 化干预等刺激产生迅速响应从而反映体内相关组织器 官的状态 。研究发现,选择原穴与合穴作为经络电 压的测量点具有最佳的稳定性与较高的准确性  。为 此,课题组采用体外抗氧化模型结合体表电生理信号 测定的方法,研究服用铁皮石斛后人体短时间内氧化 应激变化的规律,评价铁皮石斛对人体的综合功效并 为其归经作用提供客观的依据。 资料与方法 1 纳入及排除标准 纳入标准:(1)年龄>18岁, 性别不限;(2)签署知情同意书,自愿参加试验者; (3)遵从研究方案,试验期间能够配合试验进行。 排除标准:(1)有肾、肝、心血管疾病或者其他严重 器质性疾病;(2)有长期的药物治疗;(3)有酗酒、 抽烟、滥用毒品等不良嗜好。 2 药材及测定方法 2.1 铁皮石斛 特级有机高山铁皮枫斗竹盒装 购自宁波易中禾生物技术有限公司(No. 010305, 规格:25 克/瓶)。

试剂与仪器

  试剂:总抗氧化能力(FRAP、 ABTS)试剂盒购自碧云天(批号:111318190524、 042819190605)。 仪 器:Milli-Q 超 纯 水 仪( 美 国 Millipore 公 司 ),pH700pH 计( 美 国 EUTECH 公 司),CF15RX Ⅱ高速离心机(日本 HITACHI 公司), NH-4 数显电子恒温水浴锅(江苏国华电器有限公 司),SB-5200DT 型超声波清洗器(宁波新芝生物科技股份有限公司),UV-1700 紫外分光光度计(日本津岛公 司),氧化还原电位仪(梅特勒 - 托利多仪器上海有 限公司),DFT-250 手提式高速万能汤剂碎机(温岭 市林大机械有限公司),FlexStation3 钙流工作站(美 国 Molecular Devices 公司),Ag/AgCl 一次性使用 心电电极(上海钧康医用设备有限公司),RM6240C 多通道生理信号采集处理系统(成都仪器厂)。

  理化测定方法

  样品制备 将特级有机高山铁皮枫斗打 磨成铁皮石斛粉,以 1:100 的固液比准确称量铁皮 石斛粉与去离子水,混合均匀,在 50 ℃水浴超声提 取 1.5 h,离心过滤,滤渣采用同样的方法提取 1 h, 混合两次滤液,得到 10 mg/mL 的样品制备液,放 置 -20 ℃冰箱待用。 2.3.2 样品的抗氧化活性检测 样品的总抗氧 化能力 FRAP 法与总抗氧化能力 ABTS 法通过相应 试剂盒测定,具体方法根据说明书。 2.3.3 氧化还原电位测定 取 100 mL 去离子水 和铁皮石斛制备液分别进行氧化还原电位的测定。铂 电极在使用前,经过醌氢醌标准饱和溶液的标定,然 后用 ORP 电极重复测定 3 次,取平均值。

  pH 值测定 将 pH 计的电极由电极保护 帽内取出,用蒸馏水冲洗电极,用滤纸吸干。测量前 先用 pH 标准溶液校准,然后将电极放入待测样品中 (电极头完全浸没在待测液体中),轻轻摇动样品,显 示稳定后读数,重复测量 3 次并记录结果。 3 一般资料 2018 年 9 月—2019 年 3 月在浙 江工商大学食品营养科学联合研究中心收集符合纳入 标准的健康志愿者 20 名。按随机数字表法分为 2 组, 试验组 10 名,男性 6 名,女性 4 名;年龄 23~42 岁, 平均(30±3)岁;对照组 10 名,男性 5 名,女性 5 名; 年龄 22~41 岁,平均(28±4)岁。差异无统计学意 义(P>0.05)。此研究经中国科学院上海生命科学研 究院 - 浙江工商大学食品营养科学联合研究中心伦理 委员会批准(No. 31500685-1)。 4 试验方法 试验组服用铁皮石斛汤剂(铁皮 石斛样品制备液 80 mL),对照组饮用等量水。

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