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新芝超声提取-复合酶解提取

[导读]比较水超声提取、复合酶解提取(果胶酶、纤维素酶和中性蛋白酶)和 70%乙醇超声提取法所得当归提取物的化学成分及其含量。采用水超声提取、复合酶解提取和 70%乙醇超声提取法对当归中的天然化合物进行提取,并对提取物中的成分进行 HPLC 比较分析。

当归为伞形科植物当归 Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根,主产于甘肃,约占全国产量的 70%和全省产量的 80%。当归含有挥发油、多糖、有机酸和黄酮等多种成分,具有活血补血、调经止痛、润肠通便之功效,临床上主要治疗血虚痿黄、眩晕心悸、月经不调、经闭痛经、跌扑损伤、虚寒腹痛、肠燥便秘等症。天然产物的传统提取方法有水煎煮提取、有机溶剂提取法等。研究表明,纯水提取的天然物质有限,高温会引起热敏性及氧化性有效成分的分解,有机溶剂提取物中残留溶剂不易去除,后续操作易造成挥发油成分的损失,且成本相对较高。植物性中药的有效成分分布在由细胞壁包裹的细胞内部,为了提高天然产物的提取效率和充分利用资源,需采取有效方法破坏其细胞壁而使细胞中有效成分溶出,且对有效成分结构不能造成太大的破坏。超声法和酶解法有其他传统方法所不能比拟的优点,超声提取法是利用超声波传递能量,使植物细胞壁结构快速被破坏,释放细胞内的有效成分,从而提高提取效率。酶解法是通过酶反应将植物组织和细胞破坏,有利于细胞内天然产物的溶出,降低提取难度,具有高效、无毒等优点。笔者等采用 HPLC 对中药当归水超声提取、酶解超声提取和 70%乙醇超声提取液中的化学成分及其含量进行比较分析。

仪器、材料

仪器

DK-98-1 型电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司);CAV2102C 型电子天平(奥豪斯仪器上海有限公司);RE-85C 型旋转蒸发仪(上海青浦沪西仪器厂);SB25-12DTD型超声波清洗机(宁波新芝超声设备有限公司);日本岛津LC-60 高效液相色谱仪(EX1600HP 型泵,7725i 手动进样器,EX1600CO 型柱温箱,EX1600UV 型紫外检测器,EX1600WSE色谱管理系统)。

试剂与药材

甲醇、乙腈(色谱纯,山东禹王实业有限公司化工分公司);磷酸(色谱纯,天津市科密欧化学试剂有限公司);果胶酶 50 000 u/g(南宁庞博生物工程有限公司);纤维素酶,中性蛋白酶 100 000 u/g(和氏璧生物科技有限公司);食品级柠檬酸和柠檬酸钠(浙江一诺生物可以有限公司);无水乙醇(天津市富宇精细化工有限公司);纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司);当归药材购自甘肃中天药业有限责任公司。


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